物質(zhì)吸收由光源發(fā)出的某些波長(zhǎng)的光可形成吸收光譜，由于物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)不同，對(duì)光的吸收能力不同，因此每種物質(zhì)都有特定的吸收光譜，而且在一定條件下其吸收程度與該物質(zhì)的濃度成正比，分光光度法是利用物質(zhì)的這種吸收特征對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析的方法。
 

　　使用前儀器要調(diào)零、調(diào)百校準(zhǔn)，參比溶液又稱溶液。測(cè)量時(shí)用作比較的、不含被測(cè)物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常，用參比溶液掃描的曲線應(yīng)是一條平坦的直線。有時(shí)，基體中雖不含被測(cè)物質(zhì)，但含有別的物質(zhì)，這時(shí)必須保證其不影響測(cè)試。經(jīng)常碰到的是試劑中含有被測(cè)物質(zhì)，此時(shí)必須經(jīng)過純化將其除去。否則將影響測(cè)定結(jié)果。在色譜分析中，有時(shí)基體中可能存在一個(gè)以上的和被測(cè)組分相距較遠(yuǎn)的色譜峰，計(jì)算機(jī)在數(shù)據(jù)處理中不會(huì)計(jì)入它們，不影響測(cè)定。
 

　　以所含鐵離子是多少為例：
 

　　參比溶液與測(cè)量溶液則相差鐵離子含量，在測(cè)量之前要用不含鐵離子的參比溶液掃描，調(diào)整儀器后(調(diào)100的過程)，然后再測(cè)量含鐵離子溶液的比色皿，這樣測(cè)量溶液中的鐵離子會(huì)形成自己特定的峰值，次峰值與數(shù)據(jù)庫(kù)里基準(zhǔn)峰值對(duì)比會(huì)得出溶液所含量了。如果數(shù)據(jù)庫(kù)中沒有鐵離子的曲線，你還要自己先用不同鐵離子濃度的溶液做工作曲線，然后進(jìn)行測(cè)量。
 

　　1、機(jī)器開關(guān)在機(jī)器的右側(cè)，按一下會(huì)打開，有個(gè)小的屏幕，可以按數(shù)字鍵來操作選項(xiàng)，測(cè)吸光值操作。
 

　　2、按數(shù)字鍵1，進(jìn)入選項(xiàng)，有當(dāng)前參數(shù)、吸光度等。
 

　　3、點(diǎn)擊鍵盤上的GOTO鍵去設(shè)置，一般設(shè)置為600，輸入直接按數(shù)字鍵則可以。輸入之后按ENTER這個(gè)鍵，這個(gè)是確認(rèn)鍵。
 

　　4、把樣品放到比色皿里面，留一個(gè)比色皿方蒸餾水，將蒸餾水的比色皿放到第yi個(gè)其余的依次放入。
 

　　5、蓋上一起的蓋子，拉環(huán)的位置正處于測(cè)定第yi個(gè)比色皿的位置，這一步需要?dú)w零，按鍵盤上的ZREO鍵。
 

　　6、歸零之后，開始依次用力拖動(dòng)把手，顯示屏上會(huì)顯示出對(duì)應(yīng)的吸光度，依次紀(jì)錄數(shù)值，則能完成測(cè)定吸光值的實(shí)驗(yàn)。